ROS和LOPS兩類物質在體內會引發怎樣的生物效應？

臭氧的變化過程可以描述為以ROS和LOPS兩類物質形式存在的不同階段。這一過程發生在體外（如玻璃瓶中的血液）或體內（如注射了臭氧的肌肉組織），ROS物質在體內發生反應和消失的速度很快，而LOPs物質通過循環作用分布于所有組織中，最終只有一部分與細胞受體結合。它們的這些動態藥理變化使得本身潛在的毒性降低，并成為體內的長效信使。

ROS物質在血漿和淋巴液中生成速度非?？觳殡S短時小幅度的臭氧濃度下降（5-25%浮動）但是，由于還原（如脫氫抗壞血酸20）類化合物在體內的有效循環，這種下降在15-20分鐘內就可恢復正常。過氧化氫很容易擴散到細胞內，成為胞漿內反應的引物；在紅細胞、白細胞、血小板等不同類型細胞中同時產生許多生物效應。值得注意的是，細胞外液與細胞內液之間存在濃度梯度，細胞內過氧化氫的濃度僅是細胞外的十分之一。GSH、CAT、GSH-PX等物質濃度的提高伴隨水分的迅速流失；盡管如此，過氧化氫的濃度必須超出最低臨界點以催化不同的生化反應。

現在來說說為何過氧化氫被普遍認為是一種作用于不同類型血細胞上的信號分子。紅細胞會清除大量的過氧化氫分子，GSH（谷胱甘肽）在體內會迅速被氧化成GSSG，而細胞對GSH/GSSG的比值變小十分敏感，要快速修正這種不平衡可以通過壓縮GSSG或減少GSH-抗壞血酸鹽的消耗或者減少NAPDPH的量（重要的電子供體）。NAPDPH氧化生成的NAPDP會被戊糖磷酸途徑消耗，此循環中G-6PD（六磷酸葡萄糖脫氫酶）是關鍵性的酶，我們在此過程中發現ATP的值出現少量但關鍵性的增加，這可能與戊糖循環和磷酸果糖激酶的作用有關。此外，在紅血球激增的主要時期，內部PH值得微量減少（波爾效應）或2.3-DPG水平的提高會導致血紅蛋白與氧的分離曲線右移，并且使氧向骨組織的傳遞增加。顯然，要達到AHT治療的最低功效，我們需要在30-60天內將2.5-4L的血液作臭氧處理，在此過程中，LOPS物質反復作用于骨髓，這種頻繁的刺激導致紅細胞產生的氧化應激作用中抗氧化酶的臨界值發生改變。依據以上原理，患有慢性肢端缺血的病人通過臭氧治療可以得到臨床效果上的改善，因為這時紅細胞能夠更好的向病人的肢端組織傳遞大量的氧。當然，最終的治療效果還取決于局部NO、CO的釋放以及紅細胞、白細胞中生長因子的釋放。

臭氧是最不易在體內發生反應的物質之一，它不能鈍化體內的細菌、病毒和真菌，這似乎是因為細胞內的病原體有很強的抗氧化保護措施。然而，我們經過長期研究發現臭氧能通過活化嗜中性白細胞和促進細胞激動素的合成來逐漸增強免疫系統的功能。過氧化氫作為重要的傳遞者，在進入血液中的BMC細胞胞質后選擇性的氧化半胱氨酸、激活酪氨酸激酶（可以磷酸化細胞核內的轉錄因子Kb并控制異質二聚體的釋放（p50+p65））。這一復合體轉移到數百個基因片段的關鍵點上最終引發一些特定蛋白質（包括敏感時期反應物和大量白細胞介素）的合成。在過去的研究中，我們通過對臭氧化血液和體外培養的方法測量了幾種細胞因子的釋放量。一旦臭氧化的白細胞重新進入血液循環，它們會進入淋巴組織中并不斷釋放細胞因子以完成向相鄰細胞釋放副分泌物的被動免疫活動。以上過程可幫助人體擺脫周圍的不良環境，屬于先天免疫系統實施細胞生理應答功能的一部分。

在血液臭氧化過程中，特別是在加入了抗凝劑肝素之后，我們注意到臭氧增加了血小板的活躍程度，隨之引起一些特定生長因子的釋放，這些因子能夠加速局部貧血病人慢性潰瘍的愈合。一般情況下，肝素的作用總是優于檸檬酸鈉，因為前者不會與鈣離子贅和，也就加快了生化反應速度和電子傳遞。

在將臭氧化的血液注入受體的過程中，大量的內皮層細胞被LOPS物質激化，使得產物S-亞硝基硫醇、NO、S-亞硝基血紅蛋白等的含量增加。雖然NO的半衰期不到一秒鐘，NO—蛋白復合體對局部出血的血管仍有微量的修復作用。

另外，臭氧的耐受量測試表明將機體置于低水平的臭氧化合物中時會引發相應的有益反應，反之有害。我們推測LOPS物質作為長距離傳遞因子可以把氧化應激反應的信息傳遞給所有器官。骨髓部位對于以上原理尤其適用，因為LOPS可以在紅細胞發生過程中增加抗氧化酶含量并釋放激動細胞來使造血干細胞再生。另外對內分泌腺和中樞神經系統的刺激可以幫助我們理解為什么大部分延長臭氧治療的患者感到身心愉悅，這可能是由于新陳代謝加快同時伴隨荷爾蒙的分泌增加或者神經遞質的釋放造成的。

有一觀點認為臭氧最終會導致反作用于氧化應激的抗氧化反應，并且這一現象在動植物界都很普遍的得到了實驗證實。我們的研究為這一問題提供了積極方面的證據，我們發現抗氧化酶和HO-1在臭氧療法中的含量是上升的。同時也發現只要用量得當，臭氧作為氧化劑卻可以發揮抗氧化的作用，是治療慢性病毒性感染、局部缺血、細胞老化的必要條件。

結合過去十年中獲得的實驗數據和人體血液的平均抗氧化能力值，我們提出了“therapeutic window”的概念即用major AHT方法制取的無毒有效臭氧的濃度范圍。這個范圍十分的寬泛：下限是10-15μg/ml；上線是80μg/ml。濃度超過90μg/ml可能會出現早期溶血癥狀（4%-5%幾率）根據病人機體抗氧化能力的不同，臨界值在15-20μg/ml范圍內浮動。

圖解

Blood：血液  Metastasis：轉移  Vascular system ：血液循環系統

Primary tumours and metastasis：原生腫瘤和轉移瘤  Spleen：脾

Bone marrow：骨髓      Lymph nodes：淋巴結點

Lymph：淋巴結          Liver：肝臟

Other organs：其它器官       Lungs：肺部器官

圖2：輸入病患者體內的氧化后的血液會被分配遍及全身。在進入各種器官的毛細小靜脈，緩慢的促使免疫系統產生反應的白細胞之后，持續在血液系統里循環的紅血球會輸送更多的氧給缺血部位。血小板將會釋放荷爾蒙激素然后消失。經受3L的血漿和其他9-11L液體觸發處于支配全身的下垂體僅僅將會對全身發出一個有劇烈氧化應激信息。

圖中我們清楚地看到臭氧的氧化作用被體內大量的細胞外液和胞內抗氧化物所阻斷，因此當體內臭氧濃度在5-10μg/ml血液范圍內時，基本是溫和無害的。即使檢測到ROS和LOPs的存在，由于臭氧化水平很低，AHT也只會在局部位置發生效應。鑒于對臭氧毒性的警覺我們在臭氧療法中秉著“低進低出”的原則，依據病人自身條件和病癥程度的不同，將濃度分為15、20、30、40μg/ml幾個梯度，如果必要的話，按每周濃度遞增的原則實施治療。依照以上原則，我們進行了數千例治療，沒有發現任何急慢性毒副反應。在整個35-40分鐘的治療中，我們采用G19號蝶形靜脈注射器（非常適用于將血液抽入真空瓶中）進行靜脈穿刺，這樣不會感到不適。有一小部分女性患者存在靜脈輸入困難的問題，對此提出以下三種解決方法以供選擇：直腸注氣、氣體處理或用G25-27號注射器在手背的主靜脈注射含0.03-0.06%（8.8-17.6Mm）過氧化氫的葡萄糖溶液。最后一種方法可能不如AHT作用大，但也能起到一定的效果。我們不支持臭氧鹽類被直接應用，因為里面含有的次氯酸鈉會引發靜脈炎。

一般情況，治療每隔一周進行一次，如果必要，每天一次或三次也是可以的。

臭氧療法應該在何種病況下進行？

雖然常規的藥物治療不能使病人的病癥得到改善，但治療師有義務在臭氧療法進行前告知患者其他可以選擇的療法。我不想把臭氧療法與傳統的藥物治療放在兩個完全的對立面，我認為只要能治病就都是好方法。

目前為止，我們的治療經驗僅限于慢性肢端缺血，糖尿病和缺血引起的慢性皮膚潰瘍以及細胞的凋亡和萎縮（ARMD）。對于治療慢性肢端缺血，傳統的方法是注射前列腺素，但療效不佳，并且花費要遠遠高于臭氧療法。而對于ARMD病癥，傳統醫學是束手無策的，通過臨床試驗研究，臭氧療法確實對70%的ARMD患者產生了療效。其他病理學家提出的臭氧療法可與傳統治療在以下方面結合：

（1）           急慢性傳染病，特別是對那些不能被抗生素和化學試劑殺死的細菌、病毒和真菌引起的傳染病。還可以治療如賈第蟲病和隱孢子蟲病等寄生蟲病。其療效已經經由古巴醫學工作者在兒童治療中應用臭氧而得到證實。

（2）           骨髓炎、胸膜蓄膿癥、腹膜炎、瘺膿腫、慢性潰瘍、糖尿病足、昆蟲或水母造成的蟄傷，傷口感染、假真菌病和念珠菌癥。引起以上這些傳染病的病菌對抗生素都有抗藥性，如抗藥性金黃色葡萄球菌感染。因為抗生素很難進入感染區域，導致既使在一些發達國家這些病癥的死亡率還是很高。將臭氧處理的AHT配以局部應用臭氧化橄欖油和葵花籽油能夠迅速治愈被感染部位。可惜的是，臭氧化油做法的具體準備、步驟和療效不被大多數人所知，所以我在近期發表的文章中都作了描述。臭氧是一種很不穩定的氣體，但它可以和兩分子的PUFA結合形成穩定的復合物—（CH₂）7—O₃—(CH₂)7CH₃。當臭氧化油經過潰瘍處的水油界面時，臭氧分子會向水分子緩慢移動，最終形成過氧化氫。過氧化氫能夠起到殺菌和促進氧化的作用，使傷口愈合。與一般都含有無效抗生素和生長因子的藥劑相比，臭氧化油一旦被大眾所接受和使用，會為千百萬患者造福。

（3）           皰疹（HHVI和Ⅱ型）:帶狀皰疹和乳頭瘤病毒感染。使用minor型臭氧化AHT進行肌外注射作為自體接種疫苗，同時配合局部臭氧化油治療，對于治療皰疹病毒感染很有效。

以上療法與治療皰疹的藥物相結合能夠治愈大多數的皰疹感染病人。值得一提的是，新接種的疫苗對減少今后感染皰疹病毒的幾率也有效果。

   治療慢性病毒性肝炎和HIV感染時必須配以PEG干擾素+病毒唑和積極的抗艾滋藥物治療。這些藥物通常都會降低病毒的活性。總之臭氧療法對這些病癥能起到有效的輔助治療作用。

（4）            自身免疫系統疾病（多重硬化癥、類風濕性關節炎、克羅恩?。?/span>AHT對這些病癥似乎有療效，但目前沒有確鑿證據。

（5）          對其它局部缺血病癥（心肌缺血和腦缺血）臭氧療法表現出了諸多的優點，比如：

（a）      促進了缺血部位氧氣、葡萄糖和ATP的運輸。

（b）     增加骨髓干細胞的生成和血管異生，促進組織的再生。

（c）      是抗氧化酶和原血紅素氧化因子Ⅰ增加的先決條件。

（d）     啟動神經體液調節反應改善生命質量。

我們起初研究末期心臟病人，他們已經不能再實行外科手術進行心血管重組，臭氧治療傳統藥物治療相結合使病情有了一定的改觀。

（6）           機體退化紊亂：AHT對老年癡呆的早期治療有幫助，另外對糖尿病性視網膜病變、視網膜色素變性、急性聽力喪失等疾病有少許治療效果。

（7）           肺?。悍螝饽[、哮喘、阻塞型肺壞死（COPD）、敏感性呼吸不適并發癥。

    在傳統醫學中對阻塞型肺壞死（COPD）的處理是皮質類激素加上長效β2因子和抗生素，盡管如此COPD病仍是第四大導致死亡的原因。

   以上那些藥物只能延長病人的生命而不能阻止病魔的進程。針對這些疾病，臭氧療法的基本原理是：

血液中低濃度的LOPS作用于血管內皮表面，促進前列環素和一氧化氮的釋放同時減少內皮拮抗素的釋放。大家都知道S—亞硫酸醇和NO的釋放會引發血管舒張的生理反應，另一方面，超氧化陰離子的釋放會對紅細胞和血小板產生負面影響。

   其次，缺血組織中氧氣的傳遞會加強，抗氧化酶會增多，生成的血紅蛋白Ⅰ能起到對抗氧化應激作用和典型肺病的作用。另外對免疫系統的刺激會幫助肺病感染部位的修復重建。

   目前我利用臭氧療法治療阻塞型肺壞死（COPD），并已從呼吸參數和步行測試中得到了振奮人心的效果。

（8）     造成腎衰竭的原因是傳統藥物不能控制其內部慢性氧化應激反應向壞的方面發展，臭氧治療可以穩定這種壞局面，改善患者的生存質量。

（9）           同理，臭氧化的AHT配以局部使用臭氧化油的做法對于調整新陳代謝紊亂十分有效。比如它可以改善2型糖尿病人傷口潰瘍不愈合的問題，毫無疑問比起過氧化氫，患者更喜歡臭氧療法。當然我們必須嚴格控制糖水平。

（10）       皮膚病（牛皮癬，過敏性皮炎）：獲得了一些積極的數據，但還不足以說明問題。

（11）       癌癥：臭氧療程中，我們按半年一次和隔周一次的不同間斷方法對遭受放化療嚴重損傷的癌癥病人實施治療，雖然可以改善他們的生存質量，但對癌癥本身沒有什么作用。不過臭氧療法在病人剛剛實行手術之后配合放化療效果會好得多。在加強細胞毒素類藥物作用的同時減少了體內抗氧化反應和化學毒性。不幸的是，腫瘤專家們固執己見而不想認同臭氧療法。目前關于癌癥的治療仍只能延長生命而不能提高生存質量，癌癥的死亡率仍然很高。國際癌癥研究協會主席LYON,FRANCE報告指出2004年歐洲癌癥新增病例已增長到290萬并有170萬死亡。這些觸目驚心的數字表明攻克癌癥的戰役任重道遠，而以懷疑的態度來反對臭氧療法是不合情理的。

（12）       骨科疾病（腰背痛問題）：在椎間盤直接注射對于75%的病人都收到了良好效果。這是一種微創方法解決椎間問題的現代技術。還有一種間接注射法被我描述為“化學注射療法”，將10-20毫升氣體注入椎旁肌肉，此法對于三分之二的病人也是有效的，不過其效果與抗痛系統的作用相關。氣體注射對于減輕骨關節病痛苦也有幫助。

（13）       慢性勞損綜合癥和纖維肌痛：AHT對大部分此類病患者是有幫助的。

（14）       牙、口腔類疾?。撼粞鯇χ委熢缙诘闹朗钟行АＡ硗庠谏唷⒋?、臉頰局部的潰瘍處使用臭氧化油能起到迅速止痛和幫助傷口愈合的作用。

（15）       大面積燙傷、燒傷、急性腹膜炎、膿毒癥等可能導致器官壞死和死亡的緊急病癥。與傳統治療最好的配合方法是每隔3-4天使用majorAHT，以減少新陳代謝的降低和降低死亡率。對要進行器官移植的病人（尤其是心臟）在手術前6-15天左右進行6-8天major和minorAHTS治療可起到減少感染和排斥反應（外科和麻醉）的作用。在心臟移植過程中，腦和腎等器官會由于局部缺血而受到破壞，而在這之前如果對氧化應激進行調節就會減弱這種破壞，同樣的道理也可用于關節移植。這種省時省錢的預防性臭氧治療可以降低感染的幾率，減少術后住院的時間。不過由于諸多政治和經濟因素，這種預防性臭氧治療還僅處于設想階段。