臭氧療法對閉塞性動脈粥樣硬化造成的下肢缺血患者的血清中有選擇的溶酶體酶活性的研究

摘自 MedSci Monit2002Jal  &: CK520-5

Tafil Klawe M, Wozniak A, Drewa T, Ponikowska I,Drewa J，Drewa G,Wlodarczyk K,Olszewska D Klawe J,Kozlowska R

背          景

  下肢缺血與閉塞性動脈粥樣硬化等有關, 這與因各種不良生活習慣所引起的屬于 '文明病' 的其它疾病一樣。除了引發閉塞性動脈粥樣硬化的主要發病因素外,其它危險因素還包括吸煙,不健康飲食,高血脂,超重, 坐姿, 動脈高血壓和長時間處于壓力下等。

  幾種危險因素共存通常是此類疾病出現早期癥狀的原因 。病理變化并不僅限于下肢。動脈硬化的過程在所有的血管中都可能發生。                    

  在閉塞性動脈粥樣硬化中觀察到的基本的病理形態變化被稱為動脈粥樣硬化斑, 會導致脂肪沉積, 膽固醇的形成和噬菌細胞的死亡 。 它們主要沉積在大動脈和中等動脈的內膜內 。 動脈粥樣硬化斑會使血管壁變硬, 使血管流量減少。 這樣就限制了血液的流動, 會形成血栓癥。 血栓成長的時候, 脈管流量會減少, 甚至會完全受阻。結果血液不能到達人體的許多組織,會出現壞死病變和發炎的現象。

這些過程會改變細胞的物理和化學狀況。.生物細胞膜包括溶酶體細胞膜, 會失去其連續性, 導致酸性水解酶從溶酶體釋放到細胞質。 被釋放的水解酶會引發細胞的自動分解, 增加缺氧組織的壞死范圍。 

溶酶體在細胞內的消化過程中起著非常重要的作用。溶.酶體可吞噬并消化死去的細胞和細菌。溶酶體的酶活性可能是供氧不足致使組織壞死后表現的癥兆之一。 溶酶體細胞膜的破壞和水解酶釋放至細胞質, 也和血液中酶的活動增加有關。

消除閉塞性動脈粥樣硬化的危險因素只會改善有輕微缺血癥狀的患者的總體健康狀況 。保守的治療方法常常并不能恢復人體正常的血液動力狀況。 下肢閉塞性動脈粥樣硬化的治療成功率很低使得研究人員尋找其它的治療方法 。臭氧治療是其中一種治療方法, 為大家認識已有一段較長的時間, 但是主要由于技術方面的考慮, 一直未能廣為使用。                                         通過靜脈內注射氧氣和臭氧的混合氣體, 隨著壞死區供氧的改善, 可防止組織缺血癥狀的進一步惡化。 臭氧使得細胞膜更容易浸透。 2 - 3DPG 的血壓也會增加, 會有助于將血液中的氧進入人體組織。

  本研究將臭氧治療與傳統浴治療對患有閉塞性動脈粥樣硬化的患者的治療效果和三種溶酶體的血清活動進行了比較。 評估溶酶體的酶活性在特定疾病患者中的活動會使治療更加有效 , 也將有助于對特定疾病進行診斷和監控。

材料和方法

研究組

  三分之二的患者 (8個女性患者, 24 個男性患者) 在閉塞性動脈粥樣硬化過程中有下肢缺血癥狀, 接受了臭氧治療?；颊叩钠骄挲g65.8±6.9歲。患者有此癥狀的平均時間為: 4.5±3.0年。接受臭氧治療的16位患者患有缺血性心臟病, 10位患者患有動脈高血壓, 2位患者有梗塞史。

  在臭氧治療的過程中, 這些患者也服用醫生開給他們的藥物(PENTOXIFYLLINE- 24, ACETYLSALICYLIC酸- l0,抗凝血劑一2)。

三分之二的患者 (8個女性患者, 24 個男性患者) 在閉塞性動脈粥樣硬化過程中有下肢缺血癥狀接受了傳統浴療法?；颊叩钠骄挲g62±8歲。接受這種治療的所有患者都患有缺血性心臟病,其中2位患者同時患有動脈高血壓。 在治療的過程中, 這些患者也服用醫生開給他們的藥物 (PENTOXIFYLLINE 和ACETYLSALICYLIC酸)。

參照組包括30 位身體健康的人(15個女性, l5個男性),平均年齡為60歲左右。

治療

臭氧治療與傳統浴療法都是每天進行, 共計lo天, 星期六和星期日除外。

臭氧治療是以靜脈注射和30 分鐘氧氣和臭氧霧氣浴療法進行 。

將500ML正常鹽水溶人60μg/mL臭氧, 在l.5小時內注入患者的靜脈。                                     使用 ATI3臭氧發生器將臭氧溶于正常鹽水約10分鐘。                                                       在對下肢做臭氧浴期問,患者應為坐立姿勢。室內臭氧濃度為19μg/L。 比較組的患者接受旋渦式按摩治療和碳酸浴 。 研究獲得了 BYDGOSzCA 醫學院生物倫理委員會的認可 。

用子生物化學分析的血樣收集

  用于生物化學分析的血樣應按以下時問段在患者空腹時候抽取:臭氧治療前24 小時(第一次抽取),臭氧治療結束后1小時(第二次抽取),臭氧治療結束后第lo天(第三次抽取)。接受傳統浴治療的患者(比較組) 按同樣的時問段抽取。參照組的人只取一次血樣。確定血清中的以下內容:使用ANSON方法檢査組織蛋白酶D(E.C.3.4.4.23)的活動狀況; a1抗胰蛋白酶的濃度;根據BESSEY理論檢査酸性磷酸酶的活動狀況;以及根據 BLESZYNSKI 理論修改過的 ROY方法檢査芳香基硫酸脂酶的活動狀況(E.C.3. l .6. 1 . ) , 總膽固醇的血漿水平, 同時評估 LDL, HDL膽固醇和甘油三酸酯。

統計分析                              

實驗結果分別使用 T- STUDENT 測試法對獨立變量, 使用SCHEFFE測試法對非獨立變量進行了統計分析。

結   果

  在不同性別的患者之間, 溶酶體無顯著不同, 因此所得到的結果達到了平均值。

靜脈注射臭氧和下肢臭氧霧氣浴改善了患者的溶酶體的酶活性值, 達到了健康人體的水平。 (表1) ,也改善了患者的總體身體狀況。 (表2)。臭氧療法可以促進ARYLSULPHASTASE和組織蛋白酶 D的活動,減少酸性磷酸酶的活動, 降低α一 l 一抗胰蛋白酶中血清,使它們達到所觀察到的健康人的值。組織蛋白酶 D的活動和αl抗胰蛋白酶,或蛋白酶抑制劑的濃度有反向聯系(r= -0.65; p<0.00l)。

比較組的患者的下肢接受旋渦式按摩治療和碳酸浴治療后, 溶酶體的酶活性的活動和α1抗胰蛋白酶的濃度沒有明顯變化 。 與臭氧治療相對的傳統浴療法卻對患者的健康狀況沒有令人滿意的改善 。 接受臭氧治療后, 在克里多病和徑跡(TRACK)上的跛行間隔時間平均改善了40%,而躁肱動脈壓比值改善了14%。另一方面,所有的膽固醇, LDL和HDL膽固醇和身體質量指數(BMI)沒有觀察到有顯著變化。

未完待續......